Immunologi Udang

Jurnal : Immune stimulant effects of a nucleotide-rich baker's yeast extract in the kuruma shrimp, Marsupenaeus japonicas

BAB I

PENDAHULUAN

1.1              Latar Belakang

Udang termasuk pada kelas crustacean, termasuk kedalam salah satu komoditi utama pada dunia budidaya perairan, permintaan udang di kancah dunia kian lama kian meningkat seiring dengan kesadaran mutu dan kualitas gizi makanan pada khalayak. Potensi besar inilah yang harusnya dapat dimanfaatkan oleh masyarakat untuk memutar roda perekonomian.

Dalam hal ini perlu adanya perencanaan dan strategi yang tepat guna terjun langsung dalam budidaya udang itu sendiri, perbekalan ilmu yang memadai akan turut berpengaruh pada keberhasilan budidaya udang tersebut. Layaknya ikan, udang pun memiliki beberapa kendala dalam pelaksanaan pembudidayaan, contohnya masalah penyakit.

Sebagai praktisi perikanan perlu dan dianggap peting mengetahui system kekebalan udang guna menghadapi masalah penyakit dalam dunia budidaya versi budidaya udang ini.

Dapat kita ketahui system kekebalan atau imun udang dan ikan sangat berbeda, dimana ikan memiliki system imun yang lebih rumit namun simple dalam pelaksaanannya, ikan memiliki sel darah putih, dan yang lainnya guna mempertahankan kekebalan dirinya, pada udang, kekebalan tubuh hanya akan dapat dilakukan ketika udang sebelumnya diberi stimulant-stimuln yang akan mengaktifkan system kekebalan tubuhnya tatkala pathogen menyerang, dan ketika tidak diberi stimulant maka yang bereaksi hanyalah bagian dari imun eksternal saja berupa kulit dan karapasnya saja.

Mahasiswa perikanan adalah calon praktisi perikanan yang akan terjun langsung mengahadapi berbagai masalah di perikanan maka perbakalan ilmu haruslah cukup dan keterampilan lapangan juga harus mumpuni. Pemberian tugas berupa makalah ini juga termasuk salah satu upaya dari persiapan dalam disiplin ilmu yang diberikan.

1.2       Rumusan Masalah

            Adapun rumusan masalah yang terusung yakni, bagaimana isi dari jurnal “Immune stimulant effects of a nucleotide-rich baker's yeast extract in the kuruma shrimp, Marsupenaeus japonicus“ dan informasi apa saja yang dapat diambil dari jurnal tersebut?

1.3       Batasan Masalah

            Adapun batasan masalah pada bahasan kali ini yakni, pembahasan hanya menekankan pada informasi yang dapat di peroleh dalam jurnal, dapat diartikan tidak keluar dari topic yang dipaparkan oleh jurnal tersebut.

1.4       Tujuan

            Tujuan dari penyusunan makalah yang mengcu pada sumber jurnal ini antara lain,

a.)  Untuk menunjang kecakapan ilmu dari mahasiswa

b.)  Untuk memenuhi tugas makalah yang telah diberikan

c.)  Memperluas ilmu pengetahuan yang berada di luar kampus

d.)  Mengetahui informasi yang valid mengenai perikanan

e.)  Semoga dapat bermanfaat untuk pembaca

BAB II

PEMAPARAN JURNAL

2.1       Jurnal

2.1.1    Identifikasi Jurnal

Judul jurnal      :  Immune stimulant effects of a nucleotide-rich         baker's yeast extract in the kuruma shrimp, Marsupenaeus japonicas.

Peneliti            : G. Biswas, H. Korenaga, R. Nagamine, T. Kono,   H. Shimokawa, T. Itami, M. Sakai.

Tahun              : 2012

Jurnal               : Aquaculture

Halaman          : 40 sd 45 ( 5 Lembar )

Home Page      : www.elsevier.com/locate/aqua-online

2.1.2    Pemaparan Jurnal

            Akuakultur menjadi tercepat dalam sector produksi, terbukti data menyebutkan terdapat 63.600.000 ton (MT) produksi dan Tingkat pertumbuhan tahunannya mencapai  8,8% pada tahun 2011. Kontribusi dari Crustacea akuakultur adalah 5.7 MT. udang kuruma, Marsupenaeus japonicus adalah harga tertinggi spesies udang antara bertani krustasea dan berbudaya luas di Jepang, Cina, Australia dan Negara-negara Asia Tenggara. Namun penyakit yang menyerang telah membuta efek kerugian yang besar pada sector ekonomi dalam industry tambak udang. Maka dalam hal ini perlu ditingkatkan system kekebalan pada tubuh udang guna menghindari efek yang berdampak pada kerugian. Menggunakan bioproduk dan resistance terhadap penyakit adalah salah satu upaya yang mungkin dapat digunkan. Dalam hal ini AMP (anti-mikroba protein) memerankan peran utama dalam perlawanan terhadap pathogen. Jenis dari AMP itu sendiri yakni including penaeidins, crustins, anti-lipopolisakarida,  histon, dan fragmen hemocyanin.

            Dalam penelitian kali ini bahan dan metode yang digunakan yakni,

v  Eksperimen udang

Kuruma udang. Marsupenaeus japonicus (berat rata -rata, 10  ± 1 g). diperoleh dari Matsumoto Perikanan Pertanian, Miyazaki, Jepang.

Pertama udang diaklimatisasi di tangki air laut aerasi pada suhu 20 °C

dan diberi makan dengan pakan komersial (Higashimaru, Jepang) sekali sehari untuk 2 minggu di bawah penyinaran alami. Status kesehatan udang eksperimental diperiksa oleh culturing hemolymph dan hepatopankreas dari beberapa hewan sampel di laut. Agar Kaldu 2216E (Difco, Detroit, Michigan, USA) untuk presence dari setiap bakteri patogen. Hasil penelitian menunjukkan adanya ada bakteri patogen pada udang.

v  Persiapan, injeksi dan memberi makan ragi roti ekstrak udang

Ekstrak ragi roti komersial, Vertex IG20 (TableMark Co, Ltd, Tokyo, Jepang). Vertex IG20 diproses sesuai protokol. Namun, produk akhir adalah dalam bentuk bubuk halus dan berisi nucleotida (36,7%) sebagai komponen utam. Adanya mikroba contaminasi dalam ekstrak ragi roti diperiksa oleh kultur ragi ekstrak terlarut dalam phosphate-buffered saline (PBS) di

Laut Agar Kaldu 2216E (Difco) dan pertumbuhan tidak ada bakteri hidup

terdeteksi. Untuk percobaan injeksi, udang dibagi menjadi dua kelompok   (n = 20), pengobatan dan pengendalian. Udang pengobatan kelompok disuntik dengan 0,1 mL IG20 Vertex dilarutkan dalam PBS di 5 mg udang 1 Sedangkan kontrol udang kelompok menerima suntikan 0,1 mL PBS. Udang dari kedua kelompok memiliki intramuskular (im) injeksi di segmen perut kedua. Untuk makan percobaan, ekstrak ragi dicampur sebesar 5% dengan pakan komersial disebutkan di atas. Udang dibagi menjadi dua kelompok (n = 140), yaitu pengobatan (Vertex IG20 makan) dan kelompok kontrol. Udang dari kelompok perlakuan diberi makan dengan pakan campuran ekstrak ragi, sedangkan kontrol udang kelompok diberi makan dengan pakan komersial dicampur sekali sehari pada berat badan 10% selama 7 hari. Udang di kedua experimen dipertahankan dalam air laut aliran-melalui sistem pada 22 ± 2 ° C di bawah penyinaran alami.

v  Analisis ekspresi gen terkait dengan kekebalan bawaan dengan semi RT PCR kuantitatif.

Organ Limfa (LO) yang keluar dari PBS dan Vertex IG20 disuntikkan ke udang kuruma (n = 5) pada hari ke 1, 3, dan 5, sedangkan LO dari kontrol dan Vertex IG20 dicampur diet makan udang (n = 5) dikumpulkan pada 0, 1, 3 dan 5 hari setelah makan. Total RNA diekstraksi dari LO menggunakan ISOGEN (Nippon Gene, Osaka, Jepang) sesuai instruksi pabrik. Poli (A) RNA kemudian dimurnikan menggunakan mikro mRNA (Amersham Pharmacia Biotech, Swedia). Untuk menghindari adanya DNA, RNA, maka diobati dengan rekombinan DNase (RNase-free) pada suhu  37 °C selama 30 menit sesuai dengan protokol produsen. Kuantitas dan kualitas RNA dalam semua sampel diperiksa menggunakan spektrofotometer NanoDrop, ND-1000 (Thermo Ilmiah, Wilmington, DE, USA). sintesis cDNA dilakukan menggunakan ReverTra Ace qPCR RT kit (Toboya, Osaka, Jepang) dan ini cDNA berperan sebagai templet untuk PCR. Semua reaksi PCR dilakukan sesuai protocol. Amplifikasi faktor elongasi (EF)-1α gen digunakan sebagai kontrol internal. Gen tersebut merupakan kekebalan terkait pengendalian internal, utamanya masing-masing dan kondisi anil disajikan dalam produk PCR yang dielektroforesis pada 1,5% gel agarosa untuk mendeteksi band tertentu. Untuk melakukan pendekatan semi-kuantitatif ekspresi gen kuruma terkait kekebalan bawaan-udang dan gen EF-1α diamplifikasi menggunakan serangkaian nomor siklus (20-35) di bawah disebutkan di atas kondisi. Setelah menentukan jumlah siklus yang optimal, spesifik PCR dilakukan dan rasio ekspresi setiap kekebalan bawaan.

Hasil dari penelitian dipaparkan yakni sebagai berikut,

v  Ekspresi gen kekebalan yang berhubungan dengan ekstrak ragi udang disuntikkan

Dalam studi injeksi, peningkatan yang signifikan (P b0.01) dari Mj Pen adalah direkam dalam ragi ekstrak udang disuntikkan sepanjang 1-5 d periode pasca injeksi dibandingkan dengan periode PBS (kontrol) penyuntikan udang. Tingkat ekspresi tertinggi dari gen ini adalah ob disajikan pada 1 d pasca injeksi. Tingkat transkrip MjCrus di disuntikkan udang LO secara signifikan lebih tinggi (P b0.01) dari pada kontrol (PBS disuntikkan) udang pada 3 dan 5 d pasca injeksi. Ada peningkatan signifikan ekspresi gen MjLyz pada udang disuntikkan pada 1-5 d periode pasca injeksi.

v  Ekspresi gen kekebalan yang berhubungan dengan ekstrak ragi makan udang

Dalam Vertex IG20 makan udang, MjPen transkrip meningkat dibandingkan dengan kontrol diet makan udang (P b0.01) pada 1, 3 dan 5 d posting makan dengan kekalahan 10 kali lebih tinggi pada 5 d dan hampir mirip tingkat ekspresi pada tanggal 1 dan 3 d pasca makan. Signifikan Tingkat peningkatan ekspresi MjCrus (P b0.01) adalah sama dalam Vertex IG20 makan udang sepanjang 0-5 d makan post. Itu LO dari ekstrak ragi makan udang memiliki ekspresi secara signifikan lebih tinggi (P b0.01) dari MjLyz dibandingkan dengan kontrol diet makan udang.  Transkrip MjLyz mencapai nilai puncak dengan 4,5 kali sebanyak itu dari kelompok kontrol pada 1 d pos makan di Vertex IG20 makan kelompok.

v  Resistensi terhadap V. nigripulchritudo

Pada akhir 13 d uji coba pasca tantangan, udang makan dengan Vertex

IG20 pakan campuran dipamerkan kelangsungan hidup pasca infeksi secara signifikan lebih baik.

BAB III

PENUTUP

3.1 Kesimpulan

      Efek stimulan kekebalan tubuh dari ekstrak ragi nukleotida yang didapat dari roti ( Vertex IG20 ) diperiksa dalam udang kuruma, Marsupenaeus japonicus dengan memeriksa ekspresi peptida anti - mikroba / protein ( AMP ) seperti penaeidin ( MjPen ) , crustin ( MjCrus ) dan lisozim ( MjLyz ) gen . Selanjutnya , untuk mengkonfirmasi bahwa ekstrak ragi yang disebabkan AMP roti yang fungsional, pengaruh lisan administrasi pada resistensi terhadap infeksi Vibrio nigripulchritudo dalam udang kuruma . Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak ragi roti disuntikkan dan udang makan ditampilkan pada peraturan yang signifikan MjPen, MjCrus dan ekspresi gen MjLyz dalam organ limfoid . Selain itu, secara signifikan meningkatkan ( Pb0.01 ) perlawanan terhadap bakteri patogen dalam hal kelangsungan hidup pasca infeksi yang lebih baik ( 66,6 % ) diamati pada udang makan dengan ekstrak ragi dimasukkan diet dibandingkan dengan kontrol diet kelompok yang diberi pakan ( 8,3% ). Penelitian ini indikasi efek stimulan imun dari nukleotida yang kaya ekstrak ragi roti pada udang kuruma sistem imune dan mendukung potensi penggunaannya dalam akuakultur.